Información adicional

Aqui les incluyo una información adicional sobre las pruebas bioquimicas, y algunas aclaraciones. 

La identificación de bacilos entericos es de primordial importancia en la prevención de enfermedades gastrointestinales. El grupo de bacterias que se puede encontrar en el tracto intestinal de humanos y de otros mamíferos son clasificados como miembros de la familia Enterobacteriaceae. Son bacilos cortos, gram-negativos, no formadores de esporas. En esta familia se incluye:

Patógenos- Ej. Salmonella sp y Shigella sp

Patógenos ocasionales- Ej. Proteus sp, Klebsiella sp

Flora normal intestinal- Ej. Escherichia sp y Enterobacter sp

Para diferenciar entre estos grupos, se lleva a cabo una serie de pruebas llamadas IMViC (Indole, Methyl-red, Voges-proskauer, Citrate). Las pruebas son las mismas realizadas en el laboratorio #10, que ya ustedes conocen los resultados positivos y negativos. 

Además de esta información quería aclarar varios puntos:

En la prueba de TSIA: hay tres azucares: lactosa, sucrosa y glucosa. Lactosa y sucrosa estan al 1%, mientras que glucosa está a 0.1%, lo que permite la diferenciación. Tambien se mide producción de H2S, y producción de gases. Los resultados podían ser:

1) Slant rojo (alcalino), abajo amarillo (acido) con o sin gas: solamente fermentó glucosa. El organismo fermenta glucosa preferencialmente.

2) Slant amarillo (acido) y abajo amarillo (acido) con o sin gas: ocurrió fermentación de lactosa y/o sucrosa.

3) Slant rojo (alcalino) y abajo rojo (alcalino): No ocurrió ninguna fermentación.

En la prueba de SIM se mide:

Producción de H2S- se ve con cambio en color a negro

Indole- degradación de triptófano a indol

Motilidad- se determina si el crecimiento se esparce por todo el tubo. Cuando hay motilidad y producción de H2S, el color negro se ve esparcido por todo el tubo. Cuando no hay motilidad y si produccion de H2S, el negro se ve en donde se hizo la estocada. 

En la prueba de carbohidratos:

Se utilizó tres medios, son un azucar diferente en cada uno, y con un tubo Durham. El tubo servía para ver si había producción de gases. El cambio en color en todo el medio determinaba si usaba el azucar o no. 

En la prueba de nitrato se busca saber si la bacteria reduce nitratos a nitritos. En la naturaleza, la reducción de nitratos a nitritos puede continuar para producir amonia y nitrogeno. Luego de la incubación se añaden dos reactivos: ácido sulfanílico y alphanaftilamina. Si despues de añadirlos se pruduce un color "cherry red" significa que hubo reducción. Si no cambia a cherry red pueden ser dos cosas: 1) no redujo los nitratos, 2) redujo los nitratos a nitritos y luego a ammonia. Para saber cual de las dos sucedió, se añade polvo de Zinc. El Zinc reduce los nitratos a nitritos. Si el medio queda rojo, significa que el Zinc los redujo, y por ende la bacteria no reduce nitratos. Si el medio no cambia de color, queda incoloro, es que se redujeron mas alla, y por ende es positivo para reducción de nitratos. 

En muchas pruebas se utilizaron indicadores de pH para determinar cambios en color y por ende producción o utilización de algún compuesto. Los dos indicadores aqui utilizados fueron rojo fenol y rojo de metilo. 

rojo fenol- es rojo en pH neutral (7) y cambia a amarillos en medio un poco acido (6.8)

rojo de metilo- es rojo en pH acido (4) y en medio menos acido (6) cambia a amarillo. 

El Manual de Bergey, es un manual que ayuda en la identificación de bacterias desconocidas. 

Quería añadir también, que en la prueba de API hay veinte microtubos, pero se pueden leer hasta 22 pruebas.